・生化学において標的の検出や定量に広く用いられているサンドイッチELISA(注1)に適用可能な脂質膜結合性検出リガンド(注2)を開発し、A型インフルエンザウイルス(IAV)粒子の検出を実現しました。
・通常の抗体型検出リガンドとは異なり、遊離タンパク質(注3)には一切応答せず、IAV粒子を特異的に検出するため、ウイルス粒子の機能(感染力)評価が可能です。
・併用する抗体やDNAアプタマー(注4)を変更することで様々なウイルス粒子計測にも有用です。
A型インフルエンザなど、ここ10年ほどの間に世界的に大流行したウイルス感染症のほとんどは、脂質膜を持つウイルス(エンベロープウイルス)によるものです。ウイルスによる感染症拡大抑制対策にはウイルス解析技術が必要不可欠であり、一般的にはウイルス粒子内に含まれるタンパク質を計測する抗体法ならびにゲノム(核酸)を計測するPCR法が用いられています。一方、これらはウイルス粒子構造を破壊後に解析する手法であり、感染力などのウイルス粒子としての機能を評価することは困難です。
今回、東北大学大学院理学研究科の佐藤雄介准教授らの研究グループは、名古屋大学大学院医学系研究科の佐藤好隆准教授との共同研究により、典型的なエンベロープウイルスであるA型インフルエンザウイルス(IAV)粒子を解析するための新たな分析技術を開発しました。佐藤准教授らが独自に開発してきたウイルス脂質膜に結合する両親媒性α-helixペプチド(AHペプチド)(注5)をサンドイッチELISA法の検出リガンドとして用いることで、IAV粒子の選択的検出を実現しました。本手法は原理上様々な種類のエンベロープウイルスに適用可能であり、ウイルス粒子の機能解析や感染力評価などへの展開が期待できます。
本研究成果は、2026年4月2日(米国東部時間)にアメリカ化学会(ACS)の学術誌ACS Sensorsに掲載されました。
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注1. サンドイッチELISA:2種類の分子により、標的を挟み込んで(サンドイッチ)複合体を形成させ、標的を検出・定量する方法。一般的には結合分子として抗体を用いることが多く、検出用抗体の先に連結した酵素による呈色反応を用いる(ELISA:enzyme-linked immunosorbent assay、酵素結合免疫吸着測定法)。
注2. 脂質膜結合性検出リガンド:ウイルス粒子表面の脂質膜に選択的に結合する分子(リガンド)。リガンドに酵素を連結することで、酵素反応による検出が可能。
注3. 遊離タンパク質:ウイルス粒子を構成していたタンパク質が、粒子の破壊などに伴って水中に遊離したもので、感染力はない。
注4. DNAアプタマー:特定の標的分子に対して優れた結合能を有する機能性DNA。
注5. α-helixペプチド(AHペプチド):α-helix構造を取った際に、疎水面と親水面が生じるペプチド配列。両親媒性α-helix ペプチドの中には、その疎水面が高い曲率を持つ脂質二重膜の表面に現れる脂質パッキング欠損構造に挿入(疎水性挿入)される性質を持つものがある。
タイトル:Viral membrane-targeting amphipathic helical peptide ligands for colorimetric sandwich assays of influenza A virus particles
著者: Kota Matsumoto, Yusuke Sato*, Yusaku Hatanaka, Satoshi Kurihara, Yoshitaka Sato, Arihiro Narita, Seiichi Nishizawa*
*責任著者:東北大学大学院理学研究科 准教授 佐藤雄介、教授 西澤精一
掲載誌:ACS Sensors
DOI:10.1021/acssensors.6c00241
URL:https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acssensors.6c00241
大学院医学系研究科ウイルス学 佐藤 好隆 准教授
https://www.med.nagoya-u.ac.jp/virus/index.html